99久久精品日本一区二区免费,亚洲AV无码成人黄网站在线观看 ,国产又色又爽又黄的在线观看 ,人与嘼AV免费

上海臻科生物科技有限公司歡迎您!
技術文章
首頁 > 技術文章 > 小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)elisa試劑盒課題專用

小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)elisa試劑盒課題專用

 更新時間:2024-04-24 點擊量:384

小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)elisa試劑盒課題專用課題專用

小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)elisa試劑盒實驗原理

小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

樣本處理及要求

1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.  血漿:EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

注:標本溶血會影響最后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

需要而未提供的試劑盒器材

1.酶標儀(450nm

2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL2-20uL、20-200uL200-1000uL

3.37℃恒溫箱

4.蒸餾水或去離子水

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

8×12

8×6

標準品

0.3mL*6

0.3mL*6

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2

2

說明書

1

1

自封袋

1

1

 

備注

1、標準品濃度依次為:詳見說明書;

2、經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過最大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。
小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)elisa試劑盒課題專用

注意事項

1、嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2、洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3、消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。

5、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

6、在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8、任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9、不能使用過期產(chǎn)品。

10、如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。

2洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按120稀釋,即120×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

操作步驟

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6.每孔加入底物AB50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

實驗結果計算

以所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。

試劑盒性能

1、檢測范圍:詳見產(chǎn)品說明書。

2、靈敏度:詳情見說明書。

3、特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4、重復性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

 

 

亚洲国产精品美女久久久久| 再深点灬舒服灬受不了了视频| 精品久久久久久无码国产 | 美国十次导航| 久久碰国产一区二区三区| 国产亚洲色婷婷久久99精品 | 亚洲AV无码国产精品久久久不卡| 国产午夜精品一区二区三区漫画| 777久久人妻少妇嫩草av | 亚洲精品第一国产综合野草社区| 冲田杏梨k乳女教师未删减版| 久久精品国产亚洲AV大全| 天天摸天天做天天爽天天弄| 妈妈的朋友在线| 公交车被cao到合不拢腿| 国产麻豆精品一区二区三区V视界 黑人强开嫩模又小又紧 | 久久9精品区-无套内射无码| 精品成品国色天香卡一卡二卡三 | 无码任你躁久久久久久| 国产精品日韩欧美一区二区三区| 真人高清实拍女处被破的视频| 邻居少妇太爽了a片在线观看动漫| 欧洲无码一区二区三区在线观看 | FREEXXXX性中囯HD性| chinesevideo国产熟妇| 小雪第一次交换又粗又大老杨| 诱子偷伦初尝云雨孽欲天堂| 亚洲日韩一区二区三区| HD老熟女BBXXX| 日韩久久无码免费毛片软件| 色婷婷av视频一二三区小说| 邻居人妻与教练HD三级| 国产精品一区| 护士拔下内裤让我爽一夜| 无码欧美xxxxx在线观看裸| 亚洲精品乱码久久久久久 | 推特怎么在国内使用| 亚洲人成色777777精品音频| 惩罚她给她用最粗的玉势h| 亚洲一区二区三区女厕偷拍| 中文日产乱幕九区无线码|