人N末端B型鈉尿肽(NT-proBNP)ELISA試劑盒實驗原理以及注意事項

人N末端B型鈉尿肽(NT-proBNP)ELISA試劑盒實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人N末端B型鈉尿肽(NT-proBNP)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人N末端B型鈉尿肽(NT-proBNP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

人N末端B型鈉尿肽(NT-proBNP)ELISA試劑盒注意事項

1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2.洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

3.消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值。

4.底物顯色液應呈無色或很淺的顏色，已經(jīng)變藍的底物液不能使用。

5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。

6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。

7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8.任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

9.不能使用過期產(chǎn)品。

10.如果可能傳播疾病，所有的樣品都應管理好，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。